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染色体原位杂交-湖北原位杂交-武汉贝科新肽科技公司(查看)

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2025-3-7  
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原位杂交第三天

1        用1ml含10%热灭清的mabt溶液置换溶液,植物原位杂交,放置摇床上25分钟,然后用1mlmabt置换,25分钟,再用1mlmabt溶液置换,一小时以上,后用1mlmabt溶液置换,25分钟。

2        用1ml 1mm左旋米睉的staining buffer洗三次,每次放置五分钟。

3将胚胎转入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul bm purple ap substrate(底物,湖北原位杂交,用之前加5mm左旋米唑),十六孔板外面包上锡箔纸以避光,避免摇动,室温下显色。

4每隔一小时观察胚胎是否开始显色

5将显色完全的胚胎中的底物吸出,用pbst洗两三次后加上4%---固定,拍照。

64c冰箱保存。






和其它实验方法一样,必须同时设对照试验以证明其实验结果特---。对照试验的设置须根据---探针和靶核苷酸的种类和现有的可能条件去选定。ishh的优点是它的高度特---,它可测定组织、培养的单个细胞或细胞提取物中的核苷酸含量。应用高敏感度的性标记crna探针在理想的ishh的实验条件下检测mrna,其敏感度可达到20个mrna拷贝/每个细胞。由于双链dna的稳定性,在用ishh定位dna时很少发生丢失,降解,其敏感性高到能够显示在染色体铺片上,荧光原位杂交,有时甚至在组织切片上的单个基因拷贝。正因为如此,对ishh结果的解释应持慎重态度,---是前人未报告过的新发现。




荧光原位杂交fish技术具有以下优点:

可多重染色:利用不同的荧光染料标记不同的探针,染色体原位杂交,可以实现多重荧光原位杂交,从而同时检测多个序列,提高实验效率了。

高度---性和性:fish技术不仅可以用于研究已知基因或序列的染色体定位,还可以用于未基因或遗传标记及染色体畸变的研究,在基因定性、定量、整合、表达等方面的研究中颇具优势。




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